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注射級(無菌)海藻糖在低溫保存技術(shù)中的應(yīng)用有哪些?無菌的優(yōu)勢在哪?

更新時間:2025-10-21   點擊次數(shù):101次

現(xiàn)如今,隨著低溫保存技術(shù)(在低溫中,如:液氮、-70~-80℃深低溫冰箱保藏)的不斷完善,已經(jīng)實現(xiàn)了諸多生物材料的低溫保存,例如血細胞、干細胞、精子、卵細胞、胚胎、角膜、皮膚、胰島等。血細胞的長期保存供需不平解決了臨床上血液衡的問題;干細胞的保存在zhiliao再生障礙性貧血、白血病中能減少抗宿主病的發(fā)生率;生殖細胞的保存對再生醫(yī)學和輔助生殖有著重大的意義;動物胚胎保存為挽救瀕危動植物帶來了極大的社會經(jīng)濟效益;胰島的保存為qi官移植帶來了極大的便利。

海藻糖是低溫保存常用的非滲透性保護劑,這類保護劑分子不能進入細胞,但可以提高胞外溶液的溶質(zhì)濃度,不僅能在細胞外形成高滲,減少胞內(nèi)冰的形成,還具有較高的玻璃化溫度,易形成玻璃態(tài),一方面避免了低溫對細胞膜蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的損傷,另一方面將細胞膜的蛋白質(zhì)分子支撐包裹起來,使之不易變形,yi制細胞膜融合,降低細胞膜的通透性。

①qi官保存:國外市場上,含海藻糖zui有代表性的是日本京都大學研制的肺臟qi官保存液,ET-Kyoto及New ET-Kyoto液,在國內(nèi)已申請Zhuan'Li,原申請人為日本京都大學,后轉(zhuǎn)至日本大冢制藥,在中國申請的發(fā)明Zhuan'Li于2012年授權(quán)。

②細胞保存:目前研究中,應(yīng)用含不同濃度海藻糖的保護液,對低溫保存肝ai細胞、犬氣管困、卵巢ai細胞和宮頸ai細胞及小鼠受精卵,均取得了良好的保存效果。胎牛血清( FBS)也有助于細胞的冷凍保存,且在腸道腫liu組織原代細胞、牛成纖維細胞等低溫保存中效果良好。
Zheng等用麥管和石英毛細管作為冷凍載體,使用兩種滲透性保護劑EG和DMSO(體積分數(shù)為8%、15%)及一種非滲透性保護劑海藻糖(0.5 M)玻璃化保存了人臍靜脈內(nèi)皮細胞( HUVECs)。結(jié)果表明,用1.4 M EG加1.1 M DMSO,并用石英毛細管玻璃化可以得到90%的存活率。

③胚胎保存:海藻糖單獨使用或與其它保護劑混合使用,均能對胚胎的保存起到良好的保護效果,Isachenko等使用含有海藻糖的玻璃化溶液保存山羊胚胎,發(fā)現(xiàn)保存后的胚胎不論在體內(nèi)還是體外均能達到較高的生存。

④皮膚保存:賈曉明等的研究表明,海藻糖作為一種新型的冷凍保護劑,對于皮膚組織的低溫保存具有良好的保護作用。其保護作用不僅體現(xiàn)在細胞骨架,還體現(xiàn)在對皮膚組織a-輔肌動蛋白和p-整合素等的保護。

AVT的海藻糖(海保-99)具有低內(nèi)du素(實測值<0.1iu>

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